Allergiset diagnostiset testit

Allergiset diagnostiset testit

Allergian diagnoosimenetelmät. Ne suoritetaan sen jälkeen, kun joukko epäiltyjä allergeeneja on tunnistettu perusteellisen historian perusteella. Näytteet suoritetaan taudin pahenemisvaiheen ulkopuolella ja aikaisintaan 2-3 viikkoa myöhemmin. akuutin allergisen reaktion jälkeen, koska kehon herkkyys allergeenille vähenee tänä aikana.

Erota iho ja provosoiva A. d. P. Ihotestit perustuvat kehon erityisen herkistymisen tunnistamiseen tuomalla allergeeni ihon läpi. Samalla arvioidaan kehittyvän tulehdusvasteen suuruus ja luonne. Tee ero kvalitatiivisten ja kvantitatiivisten ihotestien välillä. Laadukkailla ihokokeilla määritetään herkistymisen olemassaolo tai puuttuminen tälle allergeenille. Näitä testejä käytetään allergisten sekä eräiden tarttuvien allergisten (tuberkuloosi, luomistauti jne.) Ja loislääke (helmintiaasi) diagnosoinnissa. Kvantitatiiviset ihotestit antavat kuvan kehon herkistymisasteesta. Niiden avulla määritetään tietyn allergeenin vähimmäispitoisuus, jolla se aiheuttaa näkyvän allergisen reaktion herkistyneessä organismissa. Tätä menetelmää kutsutaan allergiatitraukseksi. Sen avulla asetetaan allergeeniannos, jolla on mahdollista aloittaa erityinen yliherkkyys (herkistymisasteen lasku) tuomalla allergeeni kehoon.

Käytetystä tekniikasta riippuen ihokokeet voivat olla suoria tai epäsuoria. Suorissa ihokokeissa allergeenia ruiskutetaan ihonsisäisesti tai vahingoittamalla orvaskesi pistämällä tai naarmuttamalla. Suorilla iho- ja tiputustesteillä allergeenia (yleensä lääke tai aine) levitetään ehjälle iholle pisaran tai levityksen muodossa. Ihovastetta pidetään positiivisena, kun esiintyy hyperemiaa, tunkeutumista tai rakkuloita. Se voi tapahtua 20 minuutissa (välitön reaktio), 6-12 tunnin kuluttua (siirtymätyyppinen reaktio), 24-48 tunnin kuluttua (viivästynyt reaktio). Ihovasteen tyyppi riippuu allergisen reaktion immunologisen mekanismin luonteesta (katso Allergia). Erilaisten suorien ihokokeiden joukossa herkin on ihonsisäinen, jota seuraa arpiointi, injektio, levitys, tippuminen.

Epäsuoriin ihokokeisiin kuuluu Prausnitz-Küstner-reaktio, jossa potilaan veriseerumi injektoidaan ihon läpi terveelle ihmiselle ja kun vasta-aineet on kiinnitetty vastaanottajan ihoon (24 tunnin kuluttua), allergeeni ruiskutetaan samaan paikkaan. Paikallisen ihoreaktion kehittyminen arvioidaan vasta-aineiden ja reagiinien läsnäolon perusteella testiseerumissa. Tämä reaktio ei sulje pois mahdollisuutta siirtää taudinaiheuttajaa veriseerumiin, kun luovuttajalla on piilevä infektio, joten sen käyttö on rajoitettua. On tarkoituksenmukaisinta havaita reagiinivasta-aineita käyttämällä erilaisia ​​immuunireaktioita - entsyymi-immunomääritystä jne. (Katso Immunologiset tutkimusmenetelmät). Ihotestin tyyppi riippuu taudista, odotetusta herkkyydestä, allergeenin luonteesta ja myös ihon reaktiivisuudesta. Joidenkin lääkkeiden (antihistamiinit, rauhoittavat lääkkeet) käyttö vähentää dramaattisesti ihon reaktiivisuutta, joten ennen allergista tutkimusta on välttämätöntä pidättäytyä näiden lääkkeiden ottamisesta 5-7 päivän ajan.

Allergisten sairauksien diagnosoinnissa ei voida täysin luottaa ihokokeisiin ja yliarvioida niiden tuloksia. Ihokokeita ja niiden tulosten arviointia suorittaa vain erikoiskoulutettu lääkintähenkilöstö.

Jos allergisen historian tietojen ja ihokokeiden tulosten välillä on ristiriitaa remission aikana, provosoivat testit näytetään. Nämä testit perustuvat allergisten reaktioiden lisääntymiseen lisäämällä allergeenia elimeen tai kudokseen, jonka häviäminen johtaa taudin kuvaan. Erota sidekalvon, nenän ja sisäänhengityksen provosoivat testit. Konjunktivaalin provosoiva testi suoritetaan tiputtamalla allergeeni alempaan sidekalvopussiin. Reaktiota pidetään positiivisena, kun silmäluomien sidekalvon hyperemia, kyynelvuoto ja kutina ilmenevät. Nenän provosoiva testi suoritetaan allergisen nuhan ja pollinoosin varalta: nenän puoliskoon tiputetaan allergeenia ja toiseen neste on kontrollineste. Reaktiota pidetään positiivisena, jos nenän hengitysvaikeuksia ja kutinaa esiintyy allergeenin tiputtamisen puolella. Keuhkoputken astman etiologiseen diagnoosiin käytetään inhalaatiota provosoivaa testiä: potilas hengittää allergeeniliuoksen suun kautta aerosolisumuttimen avulla. Reaktion katsotaan olevan positiivinen, jos keuhkojen elintärkeä kapasiteetti vähenee yli 15%.

Kylmä ja lämmin nokkosihottuma (urtikaria) käytettävät kylmä- ja lämpökokeet ovat myös provosoivia testejä. Jos taudista ei ole selkeitä merkkejä, tehdään altistusta provosoiva testi. Se perustuu potilaan suoraan kosketukseen epäiltyjen allergeenien kanssa ympäristössä, jossa potilas yleensä löytyy. Tämän testin päinvastainen on eliminaatiotesti - väitetyn allergeenin poistaminen ruokavaliosta, kotitalousallergiasta kärsivän potilaan siirtäminen niin kutsuttuun allergeenittomaan osastoon jne. Leukosytopeenisia ja trombosytopeenisiä provosoivia testejä käytetään ruoka-aineallergian (ruoka-allergia) ja lääkeallergian diagnosoinnissa) (... Nämä testit perustuvat verisolujen ja verihiutaleiden määrän vähenemiseen testiallergeenin potilaalle antamisen jälkeen..

Bibliografia: Kliininen immunologia ja allergologia, toim. L. Kyllä, kään. sen kanssa., t. 1-3, M., 1986; Pytskiy V.I., Adrianova N.V. ja Artomasov A., Allergiset sairaudet, M., 1984; Moderni käytännön allergologia, toim. HELVETTI. Ado ja A.A. Polnera, M., 1963.

Allerginen menetelmä tartuntatautien diagnosoimiseksi on

Allergiset testit - biologiset reaktiot useiden sairauksien diagnosointiin, jotka perustuvat allergeenin aiheuttamaan kehon lisääntyneeseen herkkyyteen.

Monissa tartuntataudeissa kehon lisääntynyt herkkyys patogeeneille ja niiden aineenvaihduntatuotteille johtuu soluimmuniteetin aktivoitumisesta. Bakteerien, virus-, alkueläininfektioiden, mykoosien ja helmintiaasin diagnosointiin käytetyt allergiatestit perustuvat tähän. Allergiatesteillä on spesifisyyttä, mutta ne ovat usein positiivisia sairailla ja rokotetuilla.

Kaikki allergiatestit on jaettu kahteen ryhmään - in vivo ja in vitro -testit.

Allerginen menetelmä tartuntatautien diagnosoimiseksi

Monissa tartuntataudeissa kehosta tulee yliherkkä bakteereille, jotka aiheuttavat allergeeneja. Tämä ilmiö auttaa määrittämään etiologisen diagnoosin. Joissakin tapauksissa erityinen bakteeri-allergia muodostuu varhain, taudin ensimmäisinä päivinä, jota käytetään tularemian varhaiseen diagnosointiin (ihonsisäinen allergiatesti tulariinilla tulee positiiviseksi 2. - 3. päivänä).

Muissa tapauksissa kehon allerginen uudelleenjärjestely tapahtuu myöhemmin ja tietyn allergian tunnistamista voidaan käyttää takautuvaan diagnoosiin. Menetelmiä kehon yliherkkyydestä sopivien allergeenien avulla käytetään tiettyjen kroonisten sairauksien potilaiden hoitoon. Bakteeri-allergeenien terapeuttinen käyttö on perusteltua tapauksissa, joissa antibioottihoito ja muut hoitomenetelmät eivät onnistu ja tauti saa kroonisen toistuvan kurssin.

Nämä nosologiat sisältävät tällä hetkellä useita tartuntatauteja, jotka aiheuttavat kroonista ei-keuhkotuberkuloosia (verkkokalvon vaurioita), luomistautia (toistuva sydänlihastulehdus), toksoplasmoosia (tuki- ja liikuntaelinten vaurioita)..

Allergiset testit (iho- ja ihonsisäiset) ovat saaneet yleismaailmallisen tunnustuksen bakteeri-infektioiden, kuten tularemian, luomistaudin (Burne-testi), tuberkuloosin (Pirquetin ihotesti ja Mantouxin ihonsisäinen testi), toksoplasmoosin, sieni-ihovaurioiden, rauhasten ja riketsioosien (Q-kuume) diagnosoinnissa. Helpoin suorittaa on ihon allerginen testi verrattuna ihonsisäiseen ja muihin allergeenien antomenetelmiin.

Ihonsisäisen allergiatestin tekniikka on seuraava: pisara allergeenia levitetään kyynärvarren taipuisalle pinnalle tai olkapään iholle (70-prosenttisella alkoholipitoisella käsittelyllä) ja sen läpi tehdään kevyt arpeutus (ilman veren ilmestymistä!). Positiivinen testi (24 ja 48 tunnin kuluttua), kun keho herkistyy injektoidulle allergeenille, ilmenee vaihtelevalla tulehdusreaktiolla: punoitus, turvotus, rakkulat, joskus tunne paikallista kutinaa ja polttamista.

Reaktion vakavuus ja kesto riippuvat kehon herkistymisestä ja bakteeriallergeenin pitoisuudesta (esimerkiksi tuberkuloosin diagnosoinnissa sen ei tulisi olla suurempi kuin 1:10 000 (!) Keuhkojen polttoreaktioiden välttämiseksi, jatkamalla keuhkokudoksen tuhoutumista (!)).

Virusinfektioiden diagnoosi

Virusinfektioiden laboratoriodiagnoosi perustuu viruksen ja sen vasta-aineiden havaitsemiseen. Tutkimuksen materiaali on kehon ja kudosten biologiset nesteet, joissa virusta esiintyy eniten. Taudin luonteesta ja vaiheesta riippuen tutkitaan verta, aivo-selkäydinnestettä, sidekalvon, virtsaputken, kohdunkaulan, nenän ja nielun limaa, ulosteita, virtsaa ja biopsiolla tai ruumiista saatuja kudoskappaleita..

Virologisia tutkimuksia varten potilaan materiaali injektoidaan erilaisiin laboratorioeläimiin, kanan alkioihin ja kudosviljelmiin; Materiaalin ja tutkimusmenetelmän valinta määräytyy erilaisille virusinfektioille ominaisen viruksen tropismin ja sen kyvyn mukaan lisääntyä in vivo ja in vitro. Viruksen tunnistaminen suoritetaan käyttämällä erityisiä menetelmiä serologisia testejä käyttäen.

Viime vuosina polymeraasiketjureaktiota (PCR) on käytetty diagnostiikassa; erilaisten virusten indikaatioalue tällä menetelmällä kasvaa nopeasti. Tällä hetkellä on kehitetty hepatiitti A, B, C, D, G, TTV virologinen diagnoosi; herpesvirusten, sytomegaloviruksen, HIV: n jne. määrittäminen. Määritä paitsi niiden läsnäolo testimateriaalissa (veri jne.), myös viruspartikkeleiden lukumäärä (ns. "viruskuormitus" - viremian ja viruksen replikaation aste), mikä on tärkeää paitsi diagnostiikkaan, mutta myös taudin kulun dynaamiseen seurantaan ja viruslääkehoidon tehokkuuden arviointiin (viruksen määrä pienenee, kunnes se häviää).

PCR: n ohella jotkut rutiinilaboratoriomenetelmät virusinfektioiden diagnosoimiseksi säilyttävät tärkeytensä: nenän pyyhkeiden suora mikroskopia DNA- ja RNA-virusten määrittämiseksi; immunofluoresenssin (RIF), epäsuoran immunofluoresenssin (RNIF) reaktio influenssan ja muiden akuuttien hengitystieinfektioiden diagnosoinnissa; influenssavirusten puhtaiden viljelmien eristäminen niiden tyypin määrittämiseksi.

RSK: ta käytetään laajalti vasta-ainetiitterin määrittämiseen potilailla taudin aikana; hemagglutinaation esto-reaktio (RTGA), jonka avulla voidaan määrittää kehon spesifisen immunologisen vasteen aste; käytetään myös neutralointireaktioita, saostusta agarissa ja monia muita erityisiä virologisia menetelmiä.

Serologisten ja allergisten menetelmien merkitys tartuntatautien diagnosoinnissa.

Serologinen menetelmä perustuu spesifisten vasta-aineiden määritykseen veressä vastaaville patogeeneille käyttämällä erilaisia ​​reaktioita (agglutinaatio, passiivinen hemagglutinaatio jne.). Serologisia reaktioita käytetään seuraaviin tarkoituksiin: 1) tunnetun antigeenin (diagnosticum) mukaan vasta-ainepitoisuus seerumissa määritetään seerumissa, 2) tunnetun vasta-aineen (diagnostinen seerumi) mukaan, materiaalissa määritetään mikrobiantigeeni tai tunnistetaan eristetty patogeeni.

Allerginen menetelmä perustuu makro-organismin lisääntyneen herkkyyden havaitsemiseen tietyille tartuntatautien patogeeneille tai niiden elintoiminnan tuotteille. Allergiatesteissä käytetään lääkkeitä, joita kutsutaan allergeeneiksi..

5. Bakteerien patogeenisyystekijöiden pääryhmät:

1) tarttuvuuskertoimet,

2) hyökkäyksen tekijät,

3) fagosytoosia estävät tekijät,

4) fagosytoosia tukahduttavat tekijät,

5) "puolustuksen ja aggressiivisuuden" entsyymit,

6) mikrobitoksiinit (endo- ja eksotoksiinit).

6. Mitkä patogeenisyystekijät estävät fagosytoosia ja mitkä estävät fagosytoosia?

Fagosytoosia estävät tekijät estävät fagosytoosin vaiheet 1 ja 2. Tämä on kapseli, soluseinän komponentit - plasmakoagulaasi, peptidoglykaani, proteiini A, proteiini M, teikoehapot jne. Nämä tekijät joko peittävät bakteereja (kapselin hyaluronihappo) tai estävät fagosyyttien aktiivisuuden.

Fagosytoosia tukahduttavat tekijät estävät oksidatiivisen purskeen, mikä johtaa epätäydelliseen fagosytoosiin. Tämä on mikrokapseli, bakteerien, V-W-antigeenien jne..

Bakteerien tarttumistekijät, niiden luonne ja merkitys.

Tarttuvuus- ja kolonisaatiotekijät ovat taudin alkumekanismit. Niiden avulla bakteerit tunnistavat solukalvojen reseptorit, vahvistavat ja kolonisoivat soluja. Näihin tekijöihin kuuluvat soluseinän komponentit: fimbriat (lyhyet kasvut), ulkokalvoproteiinit, lipopolysakkaridi, peptidoglykaani, teikoehapot (G +).

8. Mitkä ovat hyökkäyksen tekijät? Kuinka heitä voidaan edustaa?

Hyökkäystekijät ovat tekijöitä, joilla bakteerit pääsevät soluun. G: ssä - ne voidaan esittää ulkokalvon proteiineilla. Se sisältää myös esimerkiksi hyaluronidaasientsyymin, joka tuhoaa sidekudoksen.

9. Mitä bakteerien "puolustuksen ja aggressiivisuuden" entsyymejä tiedät? Menetelmät niiden havaitsemiseksi bakteereissa.

"Puolustuksen ja aggressiivisuuden" entsyymit edistävät bakteerien leviämistä kehon kudoksissa. Näitä ovat plasmakoagulaasi, fibrinolyyttinen entsyymi, lesitinaasi, hyaluronidaasi, DNaasi jne..

Hyaluronidaasin havaitsemiseksi kaniinille injektoidaan ihon läpi 0,2 ml ripsiväriä suolaliuoksessa yhdelle depiloidun ihon alueelle ja naapurialueelle lisätään 0,2 ml ruhoa lisäämällä stafylokokki-liemiviljelmän suodos. Piste ripsiväriin injektiokohdassa suodoksella 24-48 tunnin kuluttua on useita kertoja suurempi kuin täplä ripsiväriinjektion injektiokohdassa ilman suodosta johtuen kudosten lisääntyneestä läpäisevyydestä hyaluronidaasin läsnä ollessa.

Fibrinolyyttisen entsyymin havaitsemiseksi testiviljelmä siirrostetaan Petri-maljoille plasmaa sisältävällä agar-väliaineella. 24-48 tunnin inkuboinnin jälkeen 37 asteessa muodostuu puhdistusvyöhyke fibrinolysiiniä tuottavien bakteeripesäkkeiden ympärille.

Plasmakoagulaasin havaitsemiseksi testiviljelmä siirrostetaan 0,2 ml: aan sitruunattua kani- tai ihmisen plasmaa. Plasman koagulaasituotannossa 2-4-6-18 tuntia inkuboinnin jälkeen 37 asteessa tapahtuu plasman hyytymistä. Vertailussa plasma pysyy nestemäisenä.

Lesitinaasin tunnistamiseksi tutkittava viljelmä siirrostetaan keltuaisen agariin. lesitinaasin läsnä ollessa muodostuu sameusvyöhyke ja sateenkaaren korolla bakteeripesäkkeiden ympärille.

Allerginen menetelmä tartuntatautien diagnosoimiseksi

Allergiset testit - biologiset reaktiot useiden sairauksien diagnosointiin, jotka perustuvat allergeenin aiheuttamaan kehon lisääntyneeseen herkkyyteen.

Monissa tartuntataudeissa kehon lisääntynyt herkkyys patogeeneille ja niiden aineenvaihduntatuotteille johtuu soluimmuniteetin aktivoitumisesta. Bakteerien, virus-, alkueläininfektioiden, mykoosien ja helmintiaasin diagnosointiin käytetyt allergiatestit perustuvat tähän. Allergiatesteillä on spesifisyyttä, mutta ne ovat usein positiivisia sairailla ja rokotetuilla.

Kaikki allergiatestit on jaettu kahteen ryhmään - in vivo ja in vitro -testit.

Allergiset testit in vitro perustuvat herkistymisen havaitsemiseen potilaan kehon ulkopuolella. Niitä käytetään, kun jostain syystä ihokokeita ei voida suorittaa, tai tapauksissa, joissa ihoreaktiot antavat epäselviä tuloksia..

Allergiatestien suorittamiseen käytetään allergeeneja - diagnostisia lääkkeitä, jotka on suunniteltu havaitsemaan kehon erityinen herkistyminen. Tartuntatautien diagnosoinnissa käytetyt tarttuvat allergeenit ovat puhdistettuja liemiviljelmien suodoksia, harvemmin tapettujen mikro-organismien suspensioita tai niistä eristettyjä AG: itä..

Ihotestit.Tarttuvat allergeenit ruiskutetaan yleensä ihonsisäisesti tai ihon kautta hieromalla haavoittuneisiin ihoalueisiin. Ihonsisäisellä menetelmällä 0,1 ml allergeenia ruiskutetaan kyynärvarren etupinnan keskimmäiseen kolmannekseen erityisellä ohuella neulalla. 28 - 48 tunnin kuluttua HRT-reaktion tulokset arvioidaan määrittämällä papulan koko injektiokohdassa.

Ei-tarttuvat allergeenit (kasvien siitepöly, kotitalouspöly, elintarvikkeet, lääkkeet ja kemialliset valmisteet) ruiskutetaan ihoon injektiolla (pistotesti), iholle skarifioimalla ja hankaamalla tai laimennetun allergeeniliuoksen ihonsisäisesti. IHN: ää käytetään negatiivisena kontrollina ja histamiiniliuosta positiivisena kontrollina. Tulokset otetaan huomioon 20 minuutin kuluessa (GNT) papuloiden koon (halkaisijaltaan jopa 20 mm), turvotuksen ja kutinan mukaan. Ihonsisäiset testit suoritetaan, jos pistotestin tulos on negatiivinen tai kyseenalainen. Jälkimmäiseen verrattuna allergeeniannosta pienennetään 100-5000 kertaa.

Ihotestejä hormonikorvaushoitoa varten käytetään laajasti mycobacterium tuberculosis -infektion (Mantoux-testi), luomistaudin (Burne-testi), spitaalin (Mitsudan reaktio), tularemian, rauhasien, aktinomykoosin, dermatomykoosin, toksoplasmoosin, joidenkin helmintiaasin jne..

In vitro -näytteet. Nämä tutkimusmenetelmät ovat potilaalle turvallisia, melko herkkiä ja antavat mahdollisuuden määrittää kehon allergisointitaso..

Tällä hetkellä herkistymisen määrittämiseksi on kehitetty testejä, jotka perustuvat T- ja B-lymfosyyttien, kudos basofiilien reaktioihin, yleisen spesifisen IgE: n havaitsemiseen veriseerumissa jne. Näitä ovat leukosyyttien migraation eston ja lymfosyyttien blastimuunnoksen reaktiot, spesifinen ruusukkeen muodostuminen, Shelleyn basofiilinen testi kudosbasofiilien degranulaatioreaktio sekä allergosorbenttimenetelmät (spesifisen IgE: n määrittäminen veriseerumissa).

Valkosolujen migraation reaktion esto (RTML). LMTL perustuu monosyyttien ja muiden leukosyyttien migraation tukahduttamiseen herkistyneiden lymfosyyttien tuottamien välittäjien vaikutuksesta spesifisen allergeenin läsnä ollessa..

Lymfosyyttien blastimuunnosreaktio (RBT). Tämä reaktio perustuu normaalien ääreisveren lymfosyyttien kykyyn päästä mitoosiin ja muuttua räjähdysmuodoiksi, kun niitä viljellään in vitro erityisten tekijöiden - allergeenien ja epäspesifisten mitogeneesistimulaattorien - mitogeenien (fytohemagglutiniini, konkanavaliini A ja lipopolysakkaridi) vaikutuksesta. muut aineet).

Spesifisen ruusukkeen muodostumisen reaktio Ruusukkeet ovat tyypillisiä muodostumia, jotka syntyvät in vitro punasolujen tarttumisen seurauksena immunokompetenttien solujen pintaan. Rosetointia voi tapahtua spontaanisti, koska ihmisen T-lymfosyytit sisältävät lampaiden punasolujen reseptoreita. Spontaani ruusukkeen muodostuminen terveillä ihmisillä on 52 - 53% ja toimii indikaattorina T-lymfosyyttien toiminnallisesta tilasta. Tämä ilmiö toistuu myös, jos käytetään punasoluja, joihin vastaavat allergeenit ovat kiinnittyneet..

Kudos basofiilien degranulaation reaktio Menetelmä perustuu siihen, että allergeenin vaikutuksesta tapahtuu rotan kudos basofiilien degranulaatio, joka on aiemmin herkistetty potilaan veriseerumista sytofiilisellä AT: llä..

Shelleyn basofiilinen testi: Tiedetään, että ihmisen tai kanin basofiiliset granulosyytit hajoavat myös potilaan seerumin ja allergeenin läsnä ollessa, jolle potilas on herkkä.

IgE-vasta-aineiden määritys in vitro. GNT: hen perustuva sairauksien laboratoriodiagnoosi perustuu allergeenispesifisen IgEanti-IgE: n määritykseen. Radioaktiivista leimaa käytettäessä menetelmää kutsutaan radioallergosorbenttitestiksi (PACT), mutta leimana käytetään useammin entsyymiä tai fluoresoivaa ainetta (FAST). Analyysiaika - 6-7 tuntia. Menetelmän periaate: tunnettua kiinteään pohjaan kiinnittyvää allergeenia inkuboidaan potilaan veriseerumin kanssa; seerumispesifinen IgE-anti-IgE sitoutuu allergeeniin ja pysyy siten kiinteänä substraatilla ja voi olla vuorovaikutuksessa spesifisesti lisätyn leimatun anti-IgE: n kanssa..

MedGlav.com

Sairauksien lääketieteellinen hakemisto

Allergisten sairauksien diagnoosi. Anamneesi, näytteet, testit, immunologiset tutkimukset allergioiden varalta.

DIAGNOSTISEN ALLERGIAN PERIAATTEET.


Allergisen taudin diagnosoinnin tehtävät ovat:

  • Taudin luonteen määrittäminen (allerginen tai ei-allerginen). Usein tämä voidaan todeta potilaan tyypillisten valitusten ja taudin kliinisen kuvan perusteella (esimerkiksi heinänuha, seerumitauti). Joskus kuitenkin syntyy merkittäviä vaikeuksia (esimerkiksi epätavallisilla reaktioilla lääkkeiden, ruoan jne. Ottamiseen)
  • On tarpeen erottaa, onko tietty allerginen sairaus todella allerginen vai pseudoallerginen, toisin sanoen on tarpeen määrittää immuunijärjestelmän ja ei-immuunimekanismien osallistumisaste tämän taudin kehittymiseen;
  • On tärkeää selvittää taudin syy. Syyn tuntemus yhdessä prosessin todellisen allergisen luonteen toteamisen kanssa antaa perustan riittävälle jatkohoidolle, spesifisen yliherkkyyden määrittelemiselle.

Tutkimusmenetelmien erityispiirteet ovat erityisten diagnostisten testien laajamittainen käyttö in vivo ja laboratoriossa.


ALLERGOLOGINEN ANAMNEESI.


Neuvostoliiton lääketieteellisen akatemian akateemikon A.D. Adon johdolla kehitettiin kaavio sairaushistoriasta, jossa allergologisen anamneesin kysymykset muotoiltiin yksityiskohtaisesti. Anamneesin päätehtävät:

  • Sen selvittäminen, onko perinnöllinen alttius allergisille sairauksille;
  • Tunnistaa ympäristötekijöiden ja taudin kehittymisen suhde;
  • Tunnista ne allergeeniryhmät tai yksittäiset allergeenit, jotka voivat aiheuttaa allergioita.

Kuulustelun aikana he saavat selville, mitkä allergiset sairaudet olivat aiemmin tai ovatko potilaan perheessä, miten potilas reagoi seerumien, rokotteiden ja lääkkeiden antamiseen; on havaittu taudin kausiluonteisuus, sen yhteys tavalliseen kylmään; missä ja milloin pahenemisvaiheita esiintyy, mitkä ovat elin- ja työolot.

Esimerkiksi kotipölylle allergisille potilaille on ominaista "eliminointivaikutus" - tilan paraneminen poistuessaan kotoa.
Jos olet allerginen joillekin teollisille allergeeneille, "maanantai-vaikutus" on ominaista - heikkeneminen työssä viikonlopun jälkeen. Yhteys vilustumiin havaitaan yleensä potilailla, joilla on bronkiaalisen astman tarttuva-allerginen muoto, nuha. Heinäkuumeista kärsiville potilaille on ominaista voimakas kausiluonteisuus - sen paheneminen kasvien kukinnan aikana, joiden siitepöly on allergeeni. Perinnöllinen taipumus havaitaan potilailla, joilla on reagininen allerginen reaktio.

Täten potilaan kuulustelun avulla voidaan jo määrittää mahdolliset allergeenit ja ehdottaa allergisen reaktion tyyppiä. Nämä oletukset on vahvistettava erityisillä tutkimusmenetelmillä - iho-, provosoivat ja muut testit..

IHOKOKEET ALLERGIOILLE.

Allergeenia ruiskutetaan ihon läpi kehon erityisen herkistymisen havaitsemiseksi ja tuloksena olevan turvotuksen tai tulehdusreaktion suuruuden ja luonteen arvioimiseksi. Ihokokeet (CP) suoritetaan yleensä remissiossa..

Erota: kvalitatiiviset ja kvantitatiiviset, suorat ja passiiviset ihotestit.

  • Laadulliset testit vastaavat kysymykseen: onko herkistyminen tälle allergeenille vai ei? Positiivista testiä ei vielä katsota todisteeksi siitä, että allergeeni on taudin syy. Syynä voi olla toinen allergeeni, johon CP: tä ei laitettu.Alergeenille herkistyminen ei aina johda allergisen reaktion kehittymiseen. Siksi ihmisillä, jotka ovat käytännössä terveitä, on mahdollista paljastaa herkistyminen tietyille allergeeneille (talopöly, streptokokki jne.) Ilman merkkejä allergisen reaktion kehittymisestä..
    Allergeenia voidaan pitää taudin syynä, jos positiiviset testitulokset vastaavat historian tietoja. Jos tällaista sattumaa tai CP: n ilmentymistä ei ole riittävästi, suoritetaan provosoivat testit.
  • Kvantitatiiviset testit antavat käsityksen herkistymisen asteesta. Ne on asetettu tunnistamaan yksilöllinen herkkyys ja ratkaisemaan kysymys allergeenin aloitusannoksista spesifisen yliherkkyyden aikana..
  • Direct KP: llä allergeeni annetaan tutkittavalle potilaalle. Passiivisella tai epäsuoralla CP: llä potilaan veriseerumi injektoidaan ihon sisään terveelle ihmiselle ja sitten seerumin injektiokohtiin ruiskutetaan allergeenia (Prausnitz-Küstner-reaktio)..

Ihoreaktion aika ja luonne allergeenille altistumisen jälkeen riippuvat allergisen reaktion tyypistä. Kun reagininen tyyppi (Tyyppi I) reaktio ilmestyy ensimmäisten 10-20 minuutin aikana. Se on pyöreä tai epäsäännöllinen läpipainopakkaus, jossa on pseudopodioita. Läpipainopakkauksen väri on vaaleanpunainen tai vaalea, ja sen ympärillä on valtimon hyperemia. Tätä reaktiota kutsutaan rakkulaksi, nokkosihottumaksi tai välitön tyyppi.
Allergisille prosesseille immunokompleksit ja viivästyneet tyypit (III ja IV tyypit) ihoreaktio on akuutti tulehdus, jossa on kaikki merkit - punoitus, turvotus, kuume tulehduksen alueella ja arkuus. Tyyppien III ja IV ero on kehityshetkessä ja tulehduksen voimakkuudessa. Tyypissä III tulehdus on voimakkaampi, se ilmenee 4-6 tunnin kuluttua ja katoaa 12-24 tunnin kuluttua.Tyypissä IV tulehdus saavuttaa maksimaalisen kehityksensä 24-48 tunnissa. CP: n avulla on siis mahdollista määrittää allergisen reaktion tyyppi tälle allergeenille.

Ihotestien tyypit (CP).

Sovelluksen CP (syn: iho-, ihon-, laastaritestit).
Sitä käytetään allergisten ihosairauksien hoitoon ihoalueilla, joihin vauriot eivät vaikuta. Allergeenit ovat useimmiten erilaisia ​​kemikaaleja, mukaan lukien lääkkeet. Niitä käytetään puhtaassa muodossa tai liuoksina pitoisuuksina, jotka eivät aiheuta ihoärsytystä terveillä ihmisillä. Ohjauksen asettamisen tekniikka vaihtelee. Yleensä noin 1 cm 2 sideharso kostutetaan allergeeniliuoksella ja levitetään kyynärvarren, vatsan tai selän iholle. Peitä sitten sellofaanilla ja kiinnitä liimalla. Tulokset arvioidaan 20 minuutin, 5-6 tunnin ja 1-2 päivän kuluttua.

Skarifikaation tarkistuspisteet.
Tämän tyyppisessä CP: ssä kyynärvarren iholle levitetään erilaisia ​​allergeeneja tippojen muodossa 2-2,5 cm: n etäisyydellä ja jokaisen pisaran läpi jokaisella allergeenilla varustetulla skarifikaattorilla tai neulakärjellä ne vahingoittavat orvaskestää, jotta verisuonet eivät vahingoitu. Tämäntyyppisen CP: n muunnos on injektiotesti (pistotesti) - vain iho lävistetään injektioneulalla. Scarification CP: tä käytetään tapauksissa, joissa oletetaan reagoivan allergisen reaktion esiintyminen (pollinoosin, keuhkoastman tai nuhan atooppisen muodon, Quincken edeeman, nokkosihottuman) kanssa. Ne paljastavat vain reaginisen allergiatyypin. Ne arvioidaan 15-20 minuutin kuluttua..

Ihonsisäiset testit.
Tämän tyyppisessä CP: ssä allergeeni ruiskutetaan ihonsisäisesti. Nämä testit ovat herkempiä kuin skarifikaatio, mutta myös vähemmän spesifisiä. Niitä lavastettaessa komplikaatiot ovat mahdollisia elinten ja yleisten allergisten reaktioiden muodossa. Niitä käytetään tunnistamaan herkistyminen bakteeri- ja sieniperäisille allergeeneille sekä määrittämään herkkyysaste ei-tarttuville allergeeneille. Hymenoptera-hyönteisten allergeenit eivät usein anna positiivisia skarifikaatiotestejä, joten niitä injektoidaan myös ihonsisäisesti, ja reaktio havaitaan systeemisten ilmenemismuotojen muodossa. Testi näillä allergeeneilla voidaan luokitella provosoiviksi testeiksi..

Prausnitz-Küstner -reaktio - passiivinen ihon herkistymisreaktio.
Sitä käytettiin diagnosoimaan allergiinireaktiotyypit, esimerkiksi lääke-, ruoka-aineallergiat jne., Samoin kuin reagiinien ominaisuuksien tutkimiseen ja niiden tiitterin määrittämiseen. Reaktion periaate on veriseerumin ihonsisäinen antaminen potilaalta terveelle vastaanottajalle ja tutkittujen allergeenien myöhempi tuominen näihin paikkoihin. Kun veriseerumissa on sopivia vasta-aineita, vastaanottajalle kehittyy välitön ihoreaktio injektiokohdissa. Tällä hetkellä tätä reaktiota käytetään harvoin johtuen piilevän infektion siirtymisestä veriseerumiin (hepatiittivirus jne.) Sekä laboratoriomenetelmien syntymisestä reagiinien määrittämiseksi.

CP: n intensiteetti arvioidaan joko plus-arvoilla (0–4 plus-arvoa) tai papulan tai tulehduskohdan halkaisijan perusteella. Ottaen huomioon mahdollisuuden kehittää vakavia komplikaatioita anafylaktiseen sokkiin, jos CP: n asettamistekniikkaa ei noudateta, sekä saatujen tulosten tulkinnan monimutkaisuus, CP: n voi suorittaa allergiatiloissa vain erikoiskoulutettu henkilökunta allergologin valvonnassa.

ALLERGIAN TARJOUSKOKEET.


Provosoivat testit (PT) ovat menetelmä allergisten reaktioiden etiologiseen diagnosointiin, joka perustuu tämän reaktion lisääntymiseen tuomalla allergeeni sokki-elimeen. Iskuelimen tyypin mukaan (eli elin, jonka vaurio johtaa taudin kuvassa) erotetaan seuraavat PT-tyypit.

Sidekalvon PT: tä käytetään tunnistamaan allergeenit, jotka aiheuttavat allergisen sidekalvotulehduksen tai pollioosin, joka esiintyy sidekalvotulehduksen oireiden kanssa. Suorita varoen, koska pelkäät aiheuttavan terävän tulehdusreaktion. Allergeeni tiputetaan alempaan sidekalvopussiin konsentraatiossa, joka antaa heikosti positiivisen CP: n. Positiivisella reaktiolla esiintyy kyynelnestettä, sidekalvon hyperemiaa, silmäluomien kutinaa.

Nenän PT: tä käytetään allergisen nuhan hoitoon. Turvallisin. Allergeenia samassa annoksessa kuin sidekalvon PT: tä tiputetaan puoleen nenästä. Positiivisella reaktiolla ilmestyy aivastelu, nenän kutina, rinorrhea, hengitysvaikeudet tämän nenän puolikkaan läpi. Kuorien limakalvon turvotuksen Rhinoscopic määritys, nenän kanavan kaventuminen.

Inhalaatiota PT käytetään yleensä keuhkoastmaan. Tutkimus suoritetaan remissiovaiheessa sairaalassa. Jälkimmäinen johtuu siitä, että vaikea astmakohtaus voi kehittyä välittömästi tai myöhemmin (4-24 tunnin kuluttua), joten potilasta on seurattava. Ennen PT: n asettamista pakotetun VC-käyrän merkki tallennetaan spirografiin ja sen arvo lasketaan ensimmäisessä sekunnissa - FVC; laske myös Tiffneau-kerroin, joka on FVC: n suhde; VC: lle prosentteina. Terveillä ihmisillä se on 70-80%. Sitten kohde hengittää inhalaattorin läpi ensin kontrolliliuoksen ja, jos siihen ei reagoi, allergeeniliuokset peräkkäin alkaen minimipitoisuudesta siihen, joka antaa havaittavan reaktion. Spirogrammit tallennetaan joka kerta. Testi katsotaan positiiviseksi, kun FVC laskee! ja Tiffneau-suhde yli 20%. Kehittynyt bronkospasmi pysäytetään keuhkoputkia laajentavilla aineilla. Kun samanaikaisesti määritetään maksimaalinen tilavuusvirtausnopeus uloshengityskäyrän eri osissa, on mahdollista tehdä johtopäätös esteen sijainnista (pienet tai suuremmat hengitystiet). Luvussa 19 kuvataan eksogeenisen allergisen alveoliitin PT.

Kylmää PT: tä käytetään kylmään urtikariaan. Pala jäätä tai jääpullo asetetaan kyynärvarren iholle 3 minuutiksi. Jos testi on positiivinen, rakkulallinen ihoreaktio kehittyy 5-6 minuutin kuluttua kylmän toiminnan lopettamisesta, mikä yleensä vastaa jääpalan tai pullon muotoa.

Termistä PT: tä käytetään termiseen urtikariaan. Punnituspullo kuumalla vedellä (40-42 ° C) asetetaan kyynärvarren iholle 10 minuutiksi. Positiiviselle reaktiolle on tunnusomaista rakkulan muodostuminen.

Leukosytopeenista PT: tä käytetään ruoan etiologiseen diagnosointiin ja joskus lääkeallergioihin. Ensinnäkin potilailla, joilla on ruoka-aineallergia, eliminointiruokavalion taustalla ja tyhjässä vatsassa olevissa lepo-olosuhteissa perifeerisen veren leukosyyttien määrä määritetään kahdesti tunnissa. Sitten, jos kahden tutkimuksen välinen ero ei ylitä 0,3 x 10 u / l, ne antavat syötävää ruokaa tai lääkettä. 30, 60 ja 90 minuutin kuluttua leukosyyttien määrä lasketaan. Testin katsotaan olevan positiivinen, kun leukosyyttien väheneminen on yli 1 x 10 u / l. Lääkeallergioiden yhteydessä tulee olla varovainen, ettei testata anafylaktisten reaktioiden historiaa. Negatiivinen testi ei sulje pois herkistymistä testatulle allergeenille.

Trombosytopeenista PT: tä käytetään myös ruoan etiologiseen diagnosointiin ja joskus lääkeallergioihin. Suorita samalla tavalla kuin leukosytopeeninen PT. Pidetään positiivisena, kun verihiutaleiden määrä vähenee 25% tai enemmän.

Altistumisen PT: itä käytetään ohjeellisena testinä. Tutkija, jolla ei ole selviä taudin merkkejä, asetetaan olosuhteisiin, joissa epäillyt allergeenit voivat olla esimerkiksi apteekissa, työpajassa, tallissa, myllyssä, kukkakasvien paikoissa jne. Jos ympäristössä on sopivia allergeeneja, tauti pahenee.

Provosoivien testien avulla atooppiset ja immunokompleksityypit havaitaan hyvin, viivästynyttä allergista reaktiota on vaikeampi havaita.


LABORATORIOTUTKIMUKSET ALLERGIASSA.


Erilaisilla immunologisilla tutkimusmenetelmillä on suuri merkitys olemassa olevan herkistymisen tunnistamisessa. Näiden menetelmien etuna on niiden täydellinen turvallisuus potilaille..
Kaikki immunologiset menetelmät paljastavat vain herkistymistilan, eli ne osoittavat, että tällä henkilöllä on jo ollut kontaktia tämän antigeenin (allergeenin) kanssa. Ne eivät voi toimia indikaattorina tai todisteena siitä, että juuri tälle antigeenille (allergeenille) kehittyy allerginen reaktio, koska herkistämisen lisäksi tarvitaan useita muita ehtoja allergisen reaktion toteuttamiseksi..

Koska herkistyksiä on 4 tyyppiä, diagnostisiin tarkoituksiin tulisi käyttää useita menetelmiä kaikkien neljän herkistystyypin mahdollisen osallistumisen arvioimiseksi..

Tunnistaa Reagin-tyyppi (Tyyppi I) herkistyminen, seuraavia reaktioita voidaan käyttää:

  • radioallergosorbenttitesti (RAST), joka määrittää IgE-vasta-aineet erityyppisille allergeeneille;
  • radioimmunosorbenttitesti (RIST), jonka avulla voidaan määrittää kokonais-IgE-pitoisuus. Ottaen huomioon, että reaginisen tyyppisiin sairauksiin liittyy kokonais-IgE: n lisääntyminen, tämän Ig: n lisääntynyt pitoisuus on tekijä, joka vahvistaa osittain reaginisen mekanismin osallistumisen, ja ilman tautia se toimii riskitekijänä sen kehittymiselle;
  • Schultz-Dale-reaktio on suora ja passiivinen. Suoraa reaktiota käytetään yleensä kokeissa. Tätä varten sileän lihaksen elin poistetaan herkistyneestä eläimestä, laitetaan kylpyyn ja sen supistukset kirjataan. Sitten kylpyyn lisätään allergeenia ja arvioidaan sileiden lihasten kouristusten voimakkuus. Passiivista reaktiota voidaan käyttää reagiinien havaitsemiseen sairaiden ihmisten seerumista. Tätä varten osa apinan ileumista asetetaan kylpyyn ja sitten lisätään potilaan seerumia.
    Vasta-aineet kiinnittyvät suolistoon. Myöhempi allergeenin lisääminen vastaavien vasta-aineiden läsnä ollessa aiheuttaa suoliston supistumisen.
  • basofiiliset testit - suorat ja passiiviset;
  • histamiinin spesifisen vapautumisen testi;
  • syöttösolujen degranulaatiotesti.

Sytotoksinen tyyppi (II-tyyppi) herkistyminen voidaan tunnistaa käyttämällä:

  • immunofluoresenssimenetelmän eri variantit;
  • Coombsin testi autoimmuunihemolyyttisen anemian varalta;
  • radioimmunologinen tutkimusmenetelmä;
  • Vahvista reaktio.
  • erilaiset menetelmät verenkierrossa olevien immuunikompleksien määrittämiseksi kudoksiin kerrostuneiden kompleksien biopsia-aineesta ja niiden koostumuksen analysoimiseksi;
  • nivelreuman määrittäminen;
  • erilaisia ​​menetelmiä saostuvien vasta-aineiden havaitsemiseksi.
  • menetelmät allergeenin kanssa kosketukseen joutumisen jälkeen muodostuvien lymfokiinien määrittämiseksi. Yleisimmät tämän tyyppiset reaktiot ovat makrofagien migraation estämisen ja lymfotoksiinin muodostumisen reaktiot.


Immunoblottausmenetelmä.

Tällä hetkellä yleisimmin käytetty menetelmä immunoblottaukseen.
Immunoblottaus (immunoblot) on erittäin spesifinen ja erittäin herkkä vertailumenetelmä yksittäisten antigeenien (allergeenien) vasta-aineiden havaitsemiseksi, Immunoblot on erittäin informatiivinen ja luotettava menetelmä. Tällä tutkimusmenetelmällä ei ole vasta-aiheita..


Allergiadiagnostiikka Immuno CAP.

Viime vuosina on otettu käyttöön uusia tekniikoita allergioiden tarkempaan diagnostiikkaan --- Allergiadiagnostiikka Immuno CAP.
Olla nimeltään "Allergochip Immuno CAP".

ImmunoCAP-testeissä käytetään molekyylikloonauksella saatuja keinotekoisia rekombinanttiallergeeneja. Niiden avulla saadaan sellainen tarkkuus, jota ei voida saavuttaa perinteisellä menetelmällä - määritetään paitsi tietylle allergeenille ominaiset pääkomponentit myös pienet. "Allergochip" mahdollistaa paitsi tärkeimmän allergeenin selvittämisen myös aineiden, jotka voivat aiheuttaa ristiallergiaa.

Tämän menetelmän avulla voit määrittää sekä allergisen reaktion (dermatiitti) että vaarallisemman (astma) muodot.
IgE-pitoisuuden määrittäminen mahdollistaa paitsi tämän allergisen reaktion diagnosoinnin myös ennustaa allergioiden mahdollisen jatkokehityksen.
Toinen tärkeä etu ImmunoCAP-määrityksissä on suorituksen nopeus - neljä päivää. Mutta toistaiseksi tämä on saatavilla. ei kaikille laboratorioille.

1. Tartuntatautien mikrobiologisen diagnoosin menetelmät: bakteriologiset, bakteriologiset, biologit, serolit, allergiat ja itse immuunijärjestelmä. Niiden edut ja haitat.

Bakterioskooppinen (mikroskooppinen) menetelmä - joukko menetelmiä bakteerien (mikrobien) morfologisten ja tinktuuristen ominaisuuksien havaitsemiseksi ja tutkimiseksi laboratorioviljelmässä, patologisessa materiaalissa tai ulkoisesta näytteestä mikroskopialla. Niitä käytetään diagnosoimaan tartuntatauti tai muu mikrobien aiheuttama prosessi sekä tunnistamaan eristetty puhdas viljelmä. Bakterioskooppisen tutkimuksen menetelmä on erityisen tärkeä, jos mikrobilla on morfologiset ja tinktuuriset piirteet tai erityinen lokalisointi kehon kudoksissa ja soluissa. Vain joissakin infektioissa morfologinen tutkimus riittää diagnoosin tekemiseksi.

Useimpien infektioiden diagnosoinnissa mikroskopialla, mikrobiologisen tutkimuksen ensimmäisenä vaiheena, on vain apuarvo, likimääräinen arvo..

Bakterioskooppisen menetelmän arvo on sen yksinkertaisuudessa, tekniikoiden saatavuudessa ja tulosten saamisen nopeudessa (30-60 minuuttia tai vähemmän). Sen spesifisyys eri lajien morfologian samankaltaisuuden vuoksi on kuitenkin pieni ja herkkyys rajallinen - menetelmän resoluutio on keskimäärin 100 000 solua / ml.

Mikroskooppiset menetelmät koostuvat mikroskooppivalmisteiden valmistamisesta (natiivi tai värillinen yksinkertaisilla ja monimutkaisilla menetelmillä) tutkittavasta materiaalista ja niiden mikroskopiaan käyttäen erityyppisiä mikroskooppitekniikoita (valo, pimeäkenttä, vaihekontrasti, luminesoiva, elektroninen). Useimmissa tapauksissa mikroskooppisten tutkimusten tulokset ovat ohjeellisia. Materiaalin mikroskopia voi kuitenkin määrittää joitain patogeenien morfologisia merkkejä (ytimien, flagellien läsnäolo, solunsisäiset sulkeumat jne.) Sekä vahvistaa mikro-organismien läsnäolon tai puuttumisen lähetetyissä näytteissä.

BAKTERIOLOGISET MENETELMÄT

Klassinen bakteriologinen (virologinen, mykologinen) tutkimus (kutsutaan mikrobiologisen diagnoosin "kultastandardiksi"). Sen tarkoituksena on eristää ja tunnistaa taudinaiheuttaja.

Bakteriologisen (virologisen, mykologisen) tutkimusalgoritmi koostuu seuraavista päävaiheista:

1) primaarimikroskopia (valinnainen);

2) ensisijainen kylvö puhtaan viljelmän eristämiseksi;

3) puhtaan viljelmän kertyminen;

4) eristetyn viljelmän biologisten ominaisuuksien kompleksin tutkiminen ja tunnistaminen. Puhtaiden viljelmien tunnistaminen (mikro-organismin tyyppiin asti) suoritetaan ottaen huomioon mikro-organismin morfologiset, tinktuuriset, kulttuuriset, biokemialliset, toksigeeniset ja antigeeniset ominaisuudet. Useimmissa tutkimuksissa määritetään mikrobilääkeherkkyys eristetyssä patogeenissä. Mikro-organismin roolin epidemiologista arviointia varten suoritetaan spesifinen tunnistaminen määrittämällä fagovarit, biomuutokset, resistanssit jne..

Klassisella mikrobiologisella tutkimuksella on useita haittoja. Ensinnäkin tämä on melko pitkä prosessi. Sen vähimmäisaika on 3-4 päivää, mutta voi kulua useita päiviä ja jopa viikkoja, ennen kuin eristetty patogeeni tunnistetaan tarkasti. Joillekin patogeenisille bakteereille (Vibrio cholerae, difteriabakteerit) on kehitetty nopeutettuja eristys- ja tunnistusmenetelmiä, mutta niiden avulla voit saada vastauksen aikaisintaan 36-48 tunnissa.

Mikrobiologisten tutkimusten tehtävänä on eristää mikro-organismit testimateriaalista ja tunnistaa eli määrittää niiden lajit.

Mikrobiologisen tutkimuksen perusta on bakteriologinen diagnostinen menetelmä, jonka ydin on mikro-organismien eristäminen puhtaassa viljelmässä ja niiden tunnistaminen.

Mikro-organismien tunnistamiseksi tutkitaan seuraavia ominaisuuksia:

5. Patogeeniset: patogeeniset entsyymit - lesitinaasi, plasmakoagulaasi jne. myrkyllisyys - kyky tuottaa eksotoksiineja (difteriabacillus, Staphylococcus aureus) (asiasta keskusteltiin yksityiskohtaisesti edellisen lukukauden aikana, katso aihe "Infektio. Patogeenisuus ja virulenssi

6. Antigeeninen (serologinen) (asiasta keskusteltiin yksityiskohtaisesti jakson "Immuniteetti" aiheissa, katso edellinen lukukausi)

7. Fagoloituvuus - kyky hajottaa bakteriofaagit (bakteerivirukset): herkkyys terapeuttisille faageille (tartuntatautien hoidossa) ja herkkyys diagnostisille faageille (uusina, tyypillisinä); faagityyppi - tyypillisten faagien herkkyyden määrittäminen suoritetaan mikro-organismien leviämisen lähteen ja reittien määrittämiseksi ympäristössä tai kollektiivissa (asiaa käsiteltiin yksityiskohtaisesti aiheessa "Bakteriophagy", katso vastaava aihe)

8. Bakterisiiniherkkyys ja bakteriosinogeneesi: suoritetaan mikro-organismien leviämisen lähteen ja reittien määrittämiseksi ympäristössä tai kollektiivin keskuudessa (katso aihe "Bakteerien genetiikka")

9. Herkkyys antimikrobisille lääkkeille: antibiootit, kemoterapeuttiset lääkkeet ja antiseptit (tartuntatautien hoidossa, aihe "Antibiootit"), desinfiointiaineet (desinfiointimenetelmän valitsemiseksi, katso aihe "Asepsis, antiseptiset aineet. Desinfiointi, sterilointi").

Bakteriologisen menetelmän suurin haitta on tutkimuksen kesto - 3-5 päivää ja joissakin tapauksissa jopa enemmän.

Monien taudinaiheuttajien havaitsemiseen tarkoitettujen diagnostisten tutkimusten tulokset riippuvat suurelta osin niiden tyypistä sekä patologisen materiaalin ottamisen ajasta ja menetelmästä. Materiaalin luonne määräytyy taudin kliinisten piirteiden mukaan: näiden tulisi olla substraatteja tai biologisia nesteitä, joissa taudinaiheuttajien esiintyminen on todennäköisintä taudin tässä vaiheessa. Bakteriologisen menetelmän onnistuminen riippuu suurelta osin alustavasta vaiheesta, mukaan lukien testimateriaalin kerääminen ja kuljettaminen, lähetyksen rekisteröinti bakteriologiseen laboratorioon..

BIOLOGISET MENETELMÄT

Biologisilla menetelmillä pyritään määrittämään patogeenitoksiinien läsnäolo testimateriaalissa ja taudinaiheuttajan havaitsemiseksi (varsinkin kun testinäytteen alkuainepitoisuus on pieni tai kun taudinaiheuttajaa ei voida havaita inokuloimalla esimerkiksi virus- ja rikettisairauksiin).

Eläimet infektoidaan eristämään puhdas patogeeniviljelmä tapauksissa, joissa sitä ei voida saada muilla menetelmillä (esimerkiksi kun tutkittavat kohteet ovat saastuneet vieraalla mikroflooralla, joka estää taudinaiheuttajan kasvua; mikro-organismien merkitys on vähäinen tai niiden siirtyminen suodatettavissa oleviin muotoihin).

Menetelmät sisältävät herkkien (oletetulle patogeenille herkkien) laboratorioeläinten infektoinnin testimateriaalilla, minkä jälkeen patogeenin puhtaan viljelmän eristäminen tai mikrobitoksiinin ja sen luonteen toteaminen tai tyypillisen kliinisen kuvan toistaminen..

Herkkien eläinten kokeellisten infektioiden mallintaminen on tärkeä työkalu tutkittaessa taudin patogeneesiä ja mikro-organismi-makro-organismi-vuorovaikutusten luonnetta. Biologisissa kokeissa käytetään vain terveitä eläimiä, joiden paino ja ikä ovat tietyt..

Tarttuva materiaali injektoidaan suun kautta, hengitysteihin, vatsakalvonsisäisesti, suonensisäisesti, lihaksensisäisesti, ihonsisäisesti ja ihonalaisesti, silmän etukammioon, kallon aukon läpi, suboksipitaalinen (aivojen suureen säiliöön). Eläimistä otetaan verta in vivo, vatsaontelosta, kuoleman jälkeen verta, erilaisten elinten palasia, CSF, eritteitä eri onteloista.

Haitat: a) tarve ylläpitää vivariumia; b) tutkimuksen kesto. Lisäksi jopa laboratorioinfektioiden kanssa ei ole kaukana aina mahdollista eristää taudinaiheuttajaa, mikä on erityisen ominaista virusinfektioille..

SEROLOGINEN menetelmä koostuu spesifisten vasta-aineiden tiitterin määrittämisestä potilaan seerumissa. Sen toteuttamiseen käytetään erilaisia ​​yksinkertaisia ​​(agglutinaatio ja sen lajikkeet) ja monimutkaisia ​​(RSK, ELISA jne.) Immuunireaktioita..

Klassinen serodiagnoosi perustuu:

1). Patogeenin vasta-aineiden määritys diagnostisessa tiitterissä;

2) Vasta-aineiden havaitseminen useiden tartuntatautien aiheuttajalle tutkittavassa veriseerumissa ei riitä diagnoosin tekemiseen, koska se voi heijastaa tartunnan tai rokotuksen jälkeisen immuniteetin läsnäoloa. Siksi potilaan paritetut seerumit tutkitaan, otetaan taudin ensimmäisinä päivinä ja 7-10 päivän kuluttua (joskus tämä intervalli voi olla pidempi). Tässä tapauksessa vasta-ainetiitterin nousu arvioidaan. Vasta-ainetiitterin kasvu 4 kertaa tai enemmän osoittaa vasta-aineiden tarttuvan luonteen.

3) Eksoottisten tartuntatautien sekä hepatiitin, HIV-infektion ja joidenkin muiden sairauksien kohdalla vasta-aineiden määrittämisen tosiasia osoittaa, että potilas on saanut tartunnan ja että sillä on diagnostinen arvo.

Serologista diagnostista menetelmää käytetään taudin ensimmäisen viikon lopusta toisen viikon alkuun.

Vasta-aineiden havaitsemiseksi testi-seerumiin lisätään tunnettu antigeeni. Nämä lääkkeet, joita kutsutaan diagnostisiksi lääkkeiksi, ovat tappettujen mikro-organismien (niiden yksittäisten antigeenien) tai erytrosyyttien (lateksihiukkasten) suspensio, joihin mikro-organismit tai niiden antigeenit adsorboituvat..

HENKILÖKOHTAINEN IMMUNIDIAGNOSTIIKKA

Itse-immuuni menetelmä (express)

Tarkoitus: mikrobi-antigeenien etsiminen patologisesta materiaalista serologisten immuunivasteiden avulla (katso reaktiot liitteen 6 osassa 4).

Antigeenien (AG) ja vasta-aineiden (AT) välisiä immuniteetin serologisia reaktioita kutsutaan. Verenpainetaudin determinantti sitoutuu AT: n aktiiviseen keskukseen. AG: n ja AT: n yhteys suoritetaan vety- ja hydrofobisten sidosten, ionien, Coulombin ja van der Waltzin voimien vuorovaikutuksella. AG: n ja AT: n välisen yhteyden vahvuuden tarjoavat sitoutumisvoimat paitsi AT-aktiivisen kohdan optimaalinen sopeutuminen AG-determinanttiin. Serologiset reaktiot tapahtuvat kahdessa vaiheessa. Ensimmäinen - spesifinen näkymätön - on AG: n vuorovaikutus AT: n kanssa. Toinen vaihe - näkyvä - ilmestyy reaktiotyypistä riippuen, mikä määräytyy AG: n, AT: n ja muiden reaktion ainesosien ominaisuuksien perusteella. Reaktioita on useita: agglutinaatio, saostuminen (immuunidiffuusio), hajoaminen, neutralointi jne..

Agglutinaatioreaktio

Agglutinaatioreaktiossa (RA) antigeeni osallistuu korpuskulaarisen hiukkasen muotoon. Nämä voivat olla mikro-organismien, kehon solujen, esimerkiksi punasolujen, suspensioita.

Sekoitettuna tiettyyn antiseerumiin visuaalisesti erotettavissa olevat hiutaleet - immuunikompleksit tarttuvat yhteen ja asettuvat.

Agglutinaatioreaktio voidaan asettaa kvalitatiivisesti - lasille ja kvantitatiivisesti - koeputkiin, joissa valmistetaan seerumilaimennuksia.

Epäsuora (passiivinen) hemagglutinaatioreaktio (RNGA) on eräänlainen RA-modifikaatio.

Sen olemus on siinä, että antigeenimolekyylit adsorboituvat punasolujen pinnalle (punasolujen käsittelyn jälkeen tanniinilla tai formaliinilla). Tällaiset AG-punasoluilla "ladatut" saavat kyvyn agglutinoitua tälle AG: lle spesifisellä immuuniseerumilla.

AG-AT-kompleksin muodostuminen edellyttää myös punasolujen liimaamista (hemagglutinaatti muodostuu kaivon tai koeputken pohjalle "käänteisen sateenvarjon" muodossa), mikä on helppo ottaa huomioon. Punasolut eivät siten ole suoraan mukana AG-AT-kompleksin muodostumisessa, mutta ne toimivat sen indikaattoreina.

RNGA on herkempi kuin RA.

Coombsin reaktio

Tämä on testi sellaisten epätäydellisten vasta-aineiden havaitsemiseksi, jotka eivät voi agglutinoida itse antigeenejä, mutta pystyvät sitoutumaan niihin. Reaktio suoritetaan vaiheittain: potilaan veriseerumiin lisätään punasolujen diagnoosi - tunnetut punasoluihin adsorboidut antigeenit. Inkuboinnin jälkeen punasolut pestään ja lisätään kanin anti-ihmisen globuliini AT. Tämän seurauksena antiglobuliiniseerumi tarttuu yhteen punasoluihin niihin muodostuneiden AG-AT-kompleksien kautta.

Coombsin reaktioita on kahta tyyppiä: suora ja epäsuora:

• Suora menetelmä: vastasyntyneen punasoluihin adsorboituneiden reesusvasta-aineiden havaitseminen.

Veri otetaan vastasyntyneeltä, punasolut pestään, lisätään niihin

antiglobuliinivasta-aineet: "ristikon" ilmiö toteutuu - tapahtuu silmän näkyvien punasolujen agglutinaatio

• Epäsuora menetelmä: anti-rhesus-vasta-aineiden havaitseminen äidin seerumista.

/// 1. Normaalit Rh-positiiviset punasolut lisätään koeputkeen äidin seerumilla. Äidin seerumin anti-reesus-vasta-aineet adsorboituvat punasoluihin.

2. Lisää antiglobuliiniseerumi (antiglobuliinivasta-aineet) koeputkeen: "ristikon" ilmiö toteutuu - tapahtuu silmän näkyvien punasolujen agglutinaatio

Sadereaktio

Hienodispergoitunut (liukoinen antigeeni) osallistuu saostumisreaktioon (RP). Kosketettaessa vasta-aineisiin - saostumiin muodostuu sakka.

Saostumisreaktio voidaan suorittaa nestemäisessä väliaineessa (kapeissa putkissa) ja geelissä (Petri-maljoissa). Kun asetetaan RP kapeisiin koeputkiin, neste, joka sisältää yhtä reagensseista, esimerkiksi läpinäkyvän uutteen mikrobisoluista (0,2 ml), kerrostetaan läpinäkyvälle saostuvalle seerumille (0,2 ml). Positiivisissa tapauksissa muodostuu harmaavalkoinen rengas nesteiden väliseen rajapintaan 1 - 5 minuutin kuluttua. RP, kuten RA, menee elektrolyyttiin, mutta sillä on suurempi herkkyys.

//// Saostumisreaktioiden kaaviot koeputkessa (A) ja agarissa (B).

Yksi RP: n tyypistä geelissä on reaktio kurkkumätäbasillin toksigeenisyyden määrittämiseksi. Tätä varten steriilistä suodatinpaperiliuskasta, joka on kastettu antitoksiseen kurkkumätä-seerumiin, laitetaan Petri-maljaan ravintoalustalle. Sitten malja ympätään testatuilla viljelmillä laastareina 0,6-0,8 cm: n etäisyydelle paperin reunasta. Astioita inkuboidaan 37 ° C: ssa 24 tuntia. Toksiinigeenisen viljelmän läsnä ollessa toksiinin ja antitoksiinin vuorovaikutuspaikassa muodostuu saostumisviivat kaarien muodossa (viikset, puolirenkaat).

Immunofluoresenssireaktio (RIF)

Suora viiva (Koons-menetelmä). Fluorokromeilla leimattuilla vasta-aineilla käsitellyt mikro-organismit kykenevät hohtamaan fluoresoivassa mikroskoopissa.

Epäsuora. Ensimmäisessä vaiheessa mikro-organismit ovat vuorovaikutuksessa spesifisen seerumin kanssa. Lisäksi muodostuneeseen immuunikompleksiin vaikuttaa fluorokromilla leimattu antiglobuliiniseerumi. Tämän konjugaatin immuunikompleksi hehkuu fluoresoivassa mikroskoopissa.

Komplementin kiinnitysreaktio (CBC)

Tämä on antigeenien hajoamisreaktio (esim. Sytolyysi, bakteriolyysi) vasta-aineilla, joihin osallistuu komplementti. Jos antigeeni on bakteerisolu tai virus, hajoamiseen ei liity näkyviä ilmenemismuotoja. Sen vuoksi, jotta voidaan havaita AG + AT + -komplementtikompleksin läsnäolo kokeellisessa järjestelmässä, jossa yhtä komponenteista (AG tai AT) ei tunneta, käytetään indikaattorijärjestelmää AG + AT, jossa molemmat komponentit tunnetaan ja antigeenin hajoaminen ilmenee hyvin, koska punasolut otetaan AG: ksi.... Reaktio perustuu komplementin - kompleksisen proteiinijärjestelmän selkärankaisten normaaliseerumiin - kykyyn kiinnittyä AG-AT-kompleksiin ja sitä seuraavaan antigeenin hajoamiseen. RSC: ssä on viisi komponenttia: kokeellisen järjestelmän AG-AT, jossa yhtä reagensseista ei tunneta, komplementti- ja indikaattorijärjestelmä.

Indikaattori - hemolyyttinen systeemi koostuu oinan punasolujen suspensiosta ja kanin hemolyyttisestä seerumista, joka on saatu immunisoimalla oimen punasoluilla. Jos AG ja AT kokeellisessa järjestelmässä vastaavat toisiaan, niin tämän vuorovaikutuksen tulos on komplementin sitoutuminen. Indikaattorijärjestelmä havaitsee vapaan, sitoutumattoman komplementin. Jos komplementti pysyy vapaana, se sitoutuu punasolujen kompleksiin - hemolyyttiseen seerumiin ja hajottaa punasoluja. Hemolyysin läsnäolo tarkoittaa siis negatiivista CSC-tulosta ja hemolyysin puuttuminen positiivista tulosta..

Immunomääritysmenetelmä

Erittäin herkkä menetelmä AG: n tai AT: n havaitsemiseksi AG-AT-reaktion perusteella käyttäen entsyymileimattua AG: tä tai AT: tä.

Kaaviokuva entsyymi-immunomäärityksestä AT: n havaitsemiseksi on seuraava. Tunnettu AH (virus, proteiini) - diagnosticum - kiinnittyy kiinteään faasiin. Tutkittavan tutkittavan seerumi lisätään siihen. Inkuboinnin ja pesun jälkeen antigeenispesifinen AT pysyy antigeenillä, jos sellainen on, kohteen seerumissa. AG-AT-kompleksin havaitsemiseksi siihen lisätään entsyymileimattua kanin antiglobuliiniseerumia (AGS-F). Tämän seerumin saamiseksi kani immunisoidaan ihmisen globuliineilla. Kanista saatu seerumi on leimattu entsyymillä, esimerkiksi piparjuuriperoksidaasilla. Jos testiseerumi sisältää AT-AG: tä (diagnosticum), ne toimivat antiglobuliiniseerumin antigeeninä. Toisen pesun jälkeen muodostunut AG + AT + AGS-F -kompleksi voidaan havaita lisäämällä substraatti entsyymiin ja indikaattori substraatin hajoamistuotteille. Indikaattorin värin muutos osoittaa halutun AT: n läsnäolon kohteen seerumissa.

ALLERGINEN DIAGNOSTINEN MENETELMÄ.

Monien tartuntatautien kanssa kehittyy yliherkkyystila, jossa patogeeni tai sen metaboliset tuotteet toistuvat. Tämä sairaus, jota kutsutaan tarttuvaksi allergiaksi, on ominaista tuberkuloosille, tularemialle, luomistaudille, rauhasille, kuppa, pernarutto, toksoplasmoosi, sikotauti, herpes simplex ja useille muille infektioille..

Tarttuvan allergian tunnistamiseksi käytetään allergisia diagnostisia testejä, joille sopiva allergeeni ruiskutetaan tiukasti ihonsisäisesti. Hyperemian ja tunkeutumisen läsnäolo osoittaa reaktion positiivisen tuloksen eli tarttuvan allergian läsnäolon..

Allerginen diagnoosimenetelmä perustuu allergiseen reaktioon - viivästyneen tyypin yliherkkyysreaktio (HRT).

HRT-reaktion muodostuminen ei perustu humoraaliseen, vaan kehon solun immuunivasteeseen ensimmäiseen (herkistävään) kosketukseen tietyn antigeenin kanssa. Herkistyminen liittyy tiettyyn allergeenille spesifisiä reseptoreita kantavien T-lymfosyyttien vallitsevaan lisääntymiseen. Sen jälkeen elimistössä on pitkään herkistyvien T-lymfosyyttien lisääntyvä klooni, joka reagoi spesifisen allergeenin kanssa, kun se palaa kehoon..

Solun immuunivasteen havaitseminen - viivästyneen tyypin yliherkkyys (HRT), kaavio

* Ag-bakteerien ihonsisäinen anto

* 48 - 72 tunnin kuluttua ilmenee tulehdus

* Mittaa punoituksen ja papuloiden määrä

• Ag Tx: tä vapauttavat lymfokiinit, TCTL-aktivaatio, fagosyyttien aktivaatio, tulehdus

DTH-reaktiot sisältävät: T-auttajat (stimuloivat T-efektorien muodostumista IL-2: n kautta) → T-efektorit (tuottavat lymfokiineja - kemoatraktantteja ja houkuttelevat makrofageja tulehduksen fokusointiin) → makrofagit (tuottavat monokiinivälittäjiä) → mononukleaarinen infiltraatti allergeenin injektiokohdassa → arvo tunkeutuminen riippuu kehon herkistymisasteesta ja saavuttaa maksimin 24-48 tunnin kuluttua

Allergisten diagnostisten testien avulla voidaan diagnosoida tuberkuloosi (Mantoux-testi), luomistauti (Burne-testi), tularemia (tulariinikoe), pernarutto (antraksiini-testi), chancre (Ducrey-testi), spitaali (Mitsuda-testi) ja jälkimmäinen jopa erottaa tuberkuloidimuoto (lepromiinipositiivinen) lepromatoosista (lepromiinigatiivista).

Positiivinen allerginen ihotesti osoittaa, että allergeenin kulkeutuminen testin aikana toistuu, toisin sanoen yksilöllä on ollut kontaktia mikrobiaineen kanssa aiemmin. Tässä yhteydessä ihoallergisten testien diagnostisen arvon suurin haittapuoli vaikuttaa, koska ne voivat olla positiivisia paitsi tartunnan saaneilla, myös niillä, jotka on rokotettu näitä sairauksia vastaan, samoin kuin henkilöillä, joilla on ollut sairauksia monta vuotta sitten, myös kantajissa, ts. positiivinen testi terveillä ihmisillä osoittaa vain kosketuksen mikrobiantigeenin kanssa.

Taudin luonteen määrittämisessä vain taudin aikana havaitulla siirtymällä negatiivisesta ihotestistä positiiviseen on todellinen diagnostinen arvo. Lisäksi reaktion käänne, toisin sanoen sen ilmenemisen vakavuuden kasvu uudelleen tutkimisen aikana, toimii myös perustana tämän patogeenin aiheuttaman infektion yksityiskohtaisemmalle tutkimukselle..

Kun otat joitain kortikosteroidihormonien, immunosuppressanttien lääkkeitä, samoin kuin joissakin sairauksissa (sarkoidoosi, Hodgkinin tauti ja tietyt kasvaimet), on vaikea ottaa huomioon allergiatestien tuloksia, koska näissä tapauksissa esiintyy ns. Allergiaa, ts. Merkittävä ihon yleisen reaktiivisuuden lasku.

Lisäksi, kun lapsilla esiintyy ihottumaa, kun lapsi kärsii sellaisista sairauksista kuten tuhkarokko, vesirokko, voi myös esiintyä allergiaa, ja tänä aikana, kun Mantoux-testi suoritetaan, tuberkuliinipositiivisesta lapsesta voi tulla tilapäisesti tuberkuliini-negatiivinen eli väärä-negatiivinen tulos.


Julkaisuja Syitä Allergiat